BKE 120 Biokemian työtavat 28.4.2001

Max 3p/kysymys

1. pH-mittaus lasielektrodilla: teoria ja käytäntö.

2. Mihin perustuu proteiinien erottelu SDS-polyakryyligeelielektroforeesilla?

3. Affiniteettikromatografian periaate.

4. Väkevän fosforihapon (H3PO4) pitoisuus on 85 % (w/v) ja tiheys on 1.69 g/ml. Laske miten valmistat 1 litran 0.1 M fosfaattipuskuria pH 7.4 lähtien väkevästä fosforihaposta ja natriumhydroksidista.
Atomipainot: H 1, P 31, O 16, Na 23.
Fosforihapon pKa-arvot ovat 2.148, 7.198 ja 12.36.

5. Tryptofaanin ja tyrosiinin molaariset absorptiviteetit 0.1M NaOH-liuoksessa ovat seuraavat:

Aallonpituus nm Molaarinen absorptiviteetti M-1 cm-1

Tyrosiini Tryptofaani

294.5 2375 2375
280 5225 1576

Liuos sisältää sekä tyrosiinia että tryptofaania 0.1 M NaOH:ssa. Liuoksen absorbanssi (valotie 1.00 cm) on 294.5 nm:ssa 0.500 ja 280 nm:ssa 0.700. Laske tyrosiinin ja tryptofaanin konsentraatiot eo. liuoksessa.