BKE120 Biokemian työtavat tentti 18.1.1996

1. Selitä lyhyesti seuraavien käsitteiden tai lyhenteiden
merkitys:
- ppm
- osmomolaarisuus
- absorptiospektri
- transmittanssi
- SDS-PAGE
- ligandi

2. Proteiinin isoelektrinen piste on 6,2 ja molekyylipaino
28,5 kD.
a) Missä olosuhteessa proteiini tarttuu CM-selluloosasta
valmistettuun kartonkipylvääseen?
b) Miten sen saa irtoamaan kationinvaihtopylväästä?
c) Millaista puskuria (laatu, väkevyys, pH) käyttäisit
tässä ioninvaihtokromatografiassa?

3. Kerro yksityiskohtaisesti, miten valmistaisit 0,1 M Na-
asetaattipuskurin pH 5,0 kun sinulla on käytettävissä
pH-mittari ja seuraavat reagenssit:
- 100% etikkahappo, M = 60 g/mol, tiheys = 1,05 kg/l
- kiteinen Na-asetaatti, M = 82 g/mol
- 1 M NaOH , M = 40 g/mol

4. Laske, mikä on liuosten lopullinen pH, kun 1 ml 10 M HCl
lisätään 1 litraan
a) 0,1 M NaCl-liuosta
b) 0,1 M Na-fosfaattipuskuria pH 7,0
Fosforihapolle pKa2 = 7,2.

5. Viikon vanhan NADH-liuoksen pitoisuuden tarkistamiseksi
sen absorbanssi mitattiin aallonpituuksilla 260 ja 340
nanometriä. Mikä oli liuoksen alkuperäinen pitoisuus ja
kuinka suuri osa NADH:sta oli hapettunut viikon kuluessa
NAD+:ksi, kun A260 = 0,900 ja A340 = 0,249 ?

NADH:n ja NAD+ :n molaariset absorptiviteetit ovat:
      	NADH	NAD+
260 nm	18000	18000
340 nm	 6220	    0

KYVETIN LÄPIMITTA ? 1 cm